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细菌的鉴别测定

添加时间:2018/12/25
细菌的鉴别测定
       为了有效地防止冷却水系统微生物垢的形成,往往要了解细菌的种类、数量,以便有针对性地将其杀灭。鉴别时,先从冷却水系统取出样品。将样品接种在细菌可以迅速生长的培养基中,经过一定时间后,可以测量细菌增殖的效果或计数正在生长的细菌菌落。选择对于所关心的细菌生长具有的某种专一性的培养介质和培养条件,就可在不同的细菌之间做出区别。用显微镜检查,或者试验所生长的细菌菌落,可更肯定地做出鉴定。
1、铁细菌的培养与鉴定
       用铁细菌培养基进行培养。常用的培养基为柠檬酸铁铵10g,含结晶水的硫酸镁0.5g,硫酸亚铁铵0.5g,磷酸氢钾0.5g,氯化钙0.2g,硝酸钠0.5g,琼脂20g,共溶入1L去离子水中,调pH值至6.8~7,1200℃温度下灭菌20min。做成平板后,将适度稀释的水样接种在平板上,在28-30℃下培养3d,如果有黄白色菌落即是铁细菌。也可用硫酸锰0.1g,琼脂20g在1L水中,调pH值到7.8~8,灭菌20min。在上述同样条件下培养,在培养基上出现棕黑色菌落即是铁细菌。镜检时,会发现铁细菌为丝状,盖氏铁柄杆菌则纠结在一起。用化学方法检査时,锰培养基的菌落检出有铁离子则可确认。
2、硫细菌的培养和鉴定
       用硫化钾8g,磷酸氢二钾0.2g,氯化铵0.1g,氯化镁0.1g,琼脂20g,在1L去离子水中,120℃下灭菌20min。将适度稀释的水样接种在该培养基平板上,于30℃培养3~5d,或者先在液体培养基中以同样条件培养3~5d,再把液体培养物转接于固体培养基平板上,如果出现黄白色或红褐色菌落,可能分别是硫丝菌及红硫菌。在液体培养基中加入1%氯化钡溶液,如果有白色沉淀产生表明是硫细菌。如果反应不明显,可延长培养时间到10d以上,或使用10%氯化钡溶液检验。硫酸盐还原细菌是厌氧菌,应在缺氧条件下培养。为此,可使用大试管盛培养液,接种后用胶塞塞紧,再以石蜡封固。溶液应盛满试管而不存留气泡。所用的培养基为氯化钠5g,含结晶水硫酸镁2g,硫酸钠1g,氯化铵1g,磷酸二氢钾0.5g,氯化镁0.1g,硫酸亚铁铵0.1g,70%的乳酸钠溶液5mL,去离子水1L,调pH值为7.2,在120℃下灭菌20min,装入试管中接种适度稀释的水样1mL。在30℃下培养7d,观察是否出现黑色的硫化铁或嗅到有硫化氢的气味。应和不接种的空白培养液对比,以此确定。
3、微生物垢的判断
       微生物垢呈淡红色时,可能有铁细菌存在。将微生物垢用盐酸处理,加人硫氰酸铵后呈红色,证明有铁离子存在。将溶液用氢氧化铵中和后,红色褪去而产生氢氧化铁絮状沉淀。未经酸处理的微生物膜直接加硫氰酸铵则检不出铁离子,表明铁存在。
 

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